الأساليب الكلاسيكية الموصوفة سابقاً لاشتقاق الخلايا الجذعية السرطانية من الخلايا الجذعية البشرية تمتلك قيوداً مختلفة، مثل حقيقة أنها تتسبب في فقدان خلايا هائلة؛ فهي شاقة، وتستغرق وقتا طويلا، ومكلفة؛ وهم يولدون الخلايا الجذعية السرطانية غير المتجانسة، مما يعيق توليد الخلايا الجذعية السرطانية على نطاق واسع للتطبيقات السريرية.
الأرومة المغذية هي خلايا فريدة من نوعها خارج الجنين موجودة أثناء التطور الجنيني المبكر، على وجه الخصوص، من مرحلة التويتة إلى الكيسة الأريمية، وتشارك في تكوين المشيماء في المشيمة و يعتبر BMP4 عاملاً رئيسياً لتحريض تمايز الأرومة الغاذية. ابتكر طريقة مبتكرة وفعالة للتمييز بين الخلايا الجذعية السرطانية والخلايا الجذعية

البشرية باستخدام المرحلة المتوسطة التي تشبه الأرومة الغاذية وفي وقت قصير نسبيًا (حوالي 11-16 يوماً). بالنسبة للتمايز الأرومة الغاذية، تمت إزالة وسيط الصيانة (وسط mTeSR1 الكامل) واستبداله بـ mTeSR1 ناقص عوامل التحديد المتوسطة، التي تكون خالية من كلوريد الليثيوم؛ bFGF; وTGFβ1 ومكمل بـ BMP4 وA83-01، وهو مثبط محدد لإنزيمات المستقبلات الشبيهة بالأكتيفين، وهي ALK4 وALK5 وALK7.
تم الحفاظ على الخلايا لمدة خمسة أيام مع 5٪ من ثاني أكسيد الكربون عند 37 درجة مئوية مع المراقبة المجهرية المستمرة للكشف عن التشكل الكثيف الذي يشبه الأرومة الغاذية. بعد ذلك، تم فصل الخلايا الشبيهة بالأرومة الغاذية في اليوم الخامس باستخدام TrypLE وتم طلاؤها على صفيحة استنبات مغلفة بالجيلاتين في وسائط استنبات MSC، والتي كانت تتألف من αMEM مكمل بـ 20% FBS، و1% NEAA، وL-glutamine، وتم تربيتها في 37 درجة مئوية و5% ثاني أكسيد الكربون مع تبادل الوسيط كل ثلاثة أيام.




